North Khorasan University of Medical Sciences

other القای آپوپتوز میتوکندریایی و مهار مسیرهای اتوفاژی در سلول‌های لوسمی لنفوبلاستیک حاد T توسط اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های کشندۀ طبیعی Induction of Mitochondrial Apoptosis and Suppression of Autophagic Pathways in T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia Cells by Natural Killer Cell–Derived Exosomes علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <div style="text-align: justify;">مقدمه: لوسمی لنفوبلاستیک حاد یکی از شایع‌ترین بدخیمی‌های خونی است که مقاومت به درمان و عود بیماری همچنان از چالش‌های اساسی آن محسوب می‌شود. سلول‌های کشندۀ طبیعی با ترشح اگزوزوم‌های حاوی مولکول‌های سیتوتوکسیک می‌توانند بدون تماس مستقیم، بر سلول‌های سرطانی اثر بگذارند. با توجه به نقش تعیین‌کنندۀ تعادل میان آپوپتوز و اتوفاژی در بقای سلول‌های لوسمیک، هدفِ این مطالعه بررسی اثر اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های کشندۀ طبیعی بر این محور تنظیمی در ردۀ سلولی MOLT-4 بود. روش کار: در این مطالعۀ تجربی، سلول‌های کشندۀ طبیعی از خون محیطی افراد سالم به&rlm;روش MACS جداسازی و با IL-2 فعال شدند. اگزوزوم‌ها از محیط کشت استخراج و ازنظر مورفولوژی و اندازه تأیید گردیدند. سپس، سلول‌های MOLT-4 به&rlm;مدت ۴۸ ساعت با اگزوزوم‌ها تیمار شدند. میزان آپوپتوز با فلوسایتومتری (Annexin V/PI) ارزیابی و بیان ژن‌های BAX، BCL2، Caspase-9 (CASP9)، Beclin-1 (BECN1)، ATG5، LC3B و FOXO1 با Real-time PCR سنجیده شد. یافته‌ها: تیمار با اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های کشندۀ طبیعی موجب افزایش معنی‌دار درصد آپوپتوز (001/0>P) شد. بیان ژن‌های BAX (0005/0>P) و CASP9 (0014/0>P) افزایش و بیان BCL2 (05/0>P) کاهش یافت که منجر به افزایش نسبت BAX/BCL2 گردید. همچنین هم&rlm;زمان، بیان ژن‌های مرتبط با اتوفاژی شامل BECN1 (013/0>P)، ATG5 (009/0>P) و LC3B (037/0>P) و نیز فاکتور رونویسی FOXO1 (01/0>P) به&rlm;طور معنی‌داری کاهش یافت. نتیجه‌گیری: اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های کشندۀ طبیعی با القای مسیر ذاتی آپوپتوز و مهار سیگنالینگ اتوفاژی، بقای سلول‌های لوسمی لنفوبلاستیک حاد را کاهش می‌دهند و می‌توانند به‌عنوان راهبردی نوین در ایمونوتراپی مبتنی&rlm;بر وزیکول‌های خارج‌سلولی مطرح شوند.</div> <div style="text-align: justify;">Introduction: Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is one of the most common hematologic malignancies, in which treatment resistance and disease relapse remain major clinical challenges. Natural killer (NK) cells release exosomes containing cytotoxic molecules that can exert anti-tumor effects without requiring direct cell-to-cell contact. Considering the critical role of the apoptosis–autophagy balance in leukemic cell survival, the present study aimed to investigate the effect of NK cell–derived exosomes on this regulatory axis in the MOLT-4 cell line. Methods: In this experimental study, NK cells were isolated from the peripheral blood of healthy donors using magnetic-activated cell sorting (MACS) and activated with IL-2. Exosomes were extracted from culture supernatants and characterized in terms of morphology and size. MOLT-4 cells were then treated with NK-derived exosomes for 48 h. Apoptosis was assessed by flow cytometry using Annexin V/PI staining. The expression levels of BAX, BCL2, Caspase-9 (CASP9), Beclin-1 (BECN1), ATG5, LC3B, and FOXO1 were evaluated by quantitative real-time PCR. Results: Treatment with NK cell–derived exosomes significantly increased the percentage of apoptotic cells (P < 0.001). Expression levels of BAX (P < 0.0005) and CASP9 (P < 0.0014) were significantly upregulated, while BCL2 expression (P < 0.05) was downregulated, resulting in an increased BAX/BCL2 ratio. Concurrently, the expression of autophagy-related genes, including BECN1 (P < 0.013), ATG5 (P < 0.009), and LC3B (P < 0.037), as well as the transcription factor FOXO1 (P < 0.01), was significantly decreased. Conclusion: NK cell–derived exosomes reduce the survival of acute lymphoblastic leukemia cells by inducing intrinsic apoptotic pathways and suppressing autophagic signaling. These findings suggest that NK-derived exosomes may represent a novel strategy in extracellular vesicle–based immunotherapy.  </div> لوسمی لنفوبلاستیک حاد, سلول‌های کشندۀ طبیعی, اگزوزوم‌ها, آپوپتوز, اتوفاژی Acute Lymphoblastic, Leukemia, Apoptosis, Autophagy, Exosomes, Natural Killer Cells 26 35 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-985&slc_lang=other&sid=1 Leili Aghebati-Maleki لیلی عاقبتی ملکی 100319475328460032033 100319475328460032033 No Associate Professor, Ph.D. in Medical Immunology, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran دانشیار، دکتری تخصصی ایمنی‌شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران Vida Ebrahimi ویدا ابراهیمی 100319475328460032034 100319475328460032034 No Ph.D. in Pharmaceutical Biotechnology, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran دکتری تخصصی بیوتکنولوژی دارویی، مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران Siamak Sandoghchian Shotorbani سیامک صندوقچیان شتربانی 100319475328460032035 100319475328460032035 No Associate Professor, Ph.D. in Medical Immunology, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran دانشیار، دکتری تخصصی ایمنی‌شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران Ghasem Aghazadeh Balkanlou قاسم آقازاده بالکانلو 100319475328460032036 0009-0003-3204-9298 No MD, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran دکتری عمومی پزشکی، مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران Mohammad Sadegh Soltani-Zangbar محمدصادق سلطانی زنگبار soltanim@tbzmed.ac.ir 100319475328460032037 100319475328460032037 Yes Assistant Professor, Ph.D. in Medical Immunology, Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran استادیار، دکتری تخصصی ایمنی‌شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران