fa بررسی روند تمایز سلول های شبه سلول عضله اسکلتی مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی انسان تحت تاثیر 5-azacytidine در شرایط آزمایشگاه علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <p>چکیده هدف و زمینه : در این مطالعه روند تمایز سلول های شبه سلول عضله اسکلتی مشتق از سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی انسان تحت تاثیر 5-azacytidine در شرایط آزمایشگاه مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: سلول های بنیادی بافت چربی انسان بعد از تخلیص، برای ایجاد تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک، تحت تاثیر محیط های کشت القایی استئوژنیک و آدیپوژنیک قرار گرفتند. از طرف دیگر، برای بررسی توان تمایز این سلول ها به سلول عضله اسکلتی از فاکتور 5-azacytidine [5-aza] استفاده شد. به مدت 24 ساعت برای القای تمایز به سلول عضله اسکلتی تحت تاثیر 3&micro;mol 5-azacytidine قرار گرفتند. سپس، این محیط کشت القایی با PBS شسته شد و سلول ها تا 4 هفته با محیط کشت فاقد 5-azacytidine انکوبه شدند. برای بررسی روند تمایز سلول ها از مقایسه الگو و میزان بیان mRNA ژن های اختصاصی عضله اسکلتی شامل Myogenin، Myh، a-actin، Tropomyosin و Myosin با روش RT-PCR در پایان هفته های اول تا چهارم بعد از القا استفاده شد. یافته ها: سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی چسبنده، توان تکثیری قابل ملاحظه ای را نشان دادند و مانند مطالعات پیشین پتانسیل تمایز استئوژنیک و آدیپوزنیک را نیز داشتند.mRNA ژن های مورد بررسی به صورت الگویی وابسته به زمان بیان شدند. به نحوی که بیان mRNA ژن Myog در تمام نمونه های هفته 1 تا 4، به طور معنی دار با روندی صعودی افزایش یافته بود. ژن Myh در هفته 2 نسبت به سایر هفته ها بیشترین میزان بیان خود را داشته و در هفته 4 به کمترین مقدار خود رسیده بود. میزان بیان ژن های a-actinin و Myosin در هفته 1 پایین بود. اما از هفته 2 الی 4 به طور معنی دار با روندی صعودی افزایش یافته بودند. ژن Tropomyosin در هیچکدام از نمونه ها بیان معنی داری نداشت. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان داد که سلول های بنیادی مزانشیمی بافت چربی انسان می توانند تحت تاثیر 5-azacytidine 3&micro;mol به سلول عضله اسکلتی تمایز پیدا کنند و با افزایش مدت زمان القا، این سلول های عضلانی اسکلتی تکوین یافته تر می شوند.</p> <p>Abstract Background Objectives: This study was carried out to evaluate the development of skeletal muscle-like cells derived from human adipose tissue mesenchymal stem cells induced by 5-azacytidine [5-aza] under in vitro condition. Materials and methods: Human adipose tissue mesenchymal stem cells [ADSCs] were purified. These cells were cultured in osteogenic or adipogenic induction medium to induce osteogenic and adipogenic differentiation. On the other hand, the skeletal myogenic differentiation potential of these cells was investigated using 3&micro;mol 5-azacytidine [5-aza] treatment for 24 hours. Then the culture was washed out by PBS and were put in the culture medium free of 5-aza for another 4 weeks until sampling. RT-PCR assay was performed to detect the expression of specific skeletal muscle genes including Myogenin, Myh, alpha-actin, tropomyosin and myosin at 1-4 weeks after the first induction. Results: The adherent adipose tissue-derived mesenchymal stem cells exhibited a significant proliferative capacity and also showed osteogenic and adipogenic differentiation as seen in previous studies. The expression of four skeletal muscle cells genes was detected 1st to 4th week after induction in a time-dependent manner. There was a continuous increase in expression of Myogenin gene from the 1st to 4th week, whereas that of the Myh was higher after two weeks and lower after 4 weeks in comparison to the other weeks. The levels of mRNA of alpha-actin and Myosin expression were at the highest level in the fourth week. Expression of tropomyosin gene was not significant in the samples. Conclusion: The current study indicated that stimulating human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells by 5-aza with the concentration of 3&micro;mol under in vitro condition can lead to differentiating skeletal muscle-like cells. Furthermore prolonged culture duration may lead to more differentiated cells.</p> واژه های کلیدی: بافت چربی, سلول بنیادی مزانشیمی, تمایز, سلول عضله اسکلتی Key words: Adipose tissue, Mesenchymal stem cells, differentiation, skeletal muscle cell 147 157 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-28&slc_lang=fa&sid=1 Z Namjoo Germi زینب نامجو گرمی 10031947532846007765 10031947532846007765 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران M Heydari محمد حسن حیدری 10031947532846007766 10031947532846007766 Yes دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران M Noruzian محسن نوروزیان 10031947532846007767 10031947532846007767 No دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران R Mastari Farahani رضا ماستری فراهانی 10031947532846007768 10031947532846007768 No ، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران T Altarihi تقی الطریحی 10031947532846007769 10031947532846007769 No دانشگاه تربیت مدرس،تهران،ایران A Piryaei عباس پیریایی 10031947532846007770 10031947532846007770 No ، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران V Bayati وحید بیاتی 10031947532846007771 10031947532846007771 No مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز؛ ایران M Heydari محمد حسین حیدری 10031947532846007772 10031947532846007772 No دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی هرمزگان ، بوشهر ،ایران