fa بهینه سازی محصول PCRتوالی پروموترغنی ازG+C ژن انسانی Astrocyte elevated gene -1 علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <p>چکیده زمینه و هدف: اکثر ژن‌های خانه‌دار، سرکوبگر تومور، و تقریبا 40% ژن‌های اختصاصی بافت‌ها حاوی توالی غنی از G+C در نواحی پروموتری خود می‌باشند که تکثیر آن با مشکلات زیادی همراه است. ژنAstrocyte elevated gene -1(AEG-1) دارای نقش عملکردی در چندین مرحله از پیشرفت تومور از جمله، ترانسفورماسیون، آپوپتوزیس، متاستاز، مقاومت به شیمی درمانی، رگزایی و پیری سلول می‌باشد. مواد و روش کار: این مطالعه، به بهینه سازی واکنش زنجیره‌ای پلیمر از (PCR) برای تکثیر موفق bp 495 از پروموتر ژن AEG-1، دارای محتوی >70%G+C و جایگاه اتصال چندین فاکتور رونویسی در بیماران مبتلا به هپاتوسلولار کارسینوما پرداخته است. یافته ها: یافته‌ها نشان می‌دهد استفاده از CO-Amplification، DMSO به همراه برنامه Touch down PCR و آنزیم pfu در تخریب ساختارهای ثانویه توالی‌های DNA و افزایش محصول واکنش موثر می‌باشد. نتیجه گیری: این روش می تواند برای تکثیر دیگر نواحی غنی از G+C نیز مورد استفاده قرار گیرد</p> <p>Abstract Background and Objectives: Most housekeeping genes, tumor-suppressor genes, and approx 40% of tissue specific genes contain G+C sequences in their promoter region that are very difficult to amplify. AEG-1 plays a significant role in invasion, metastasis, angiogenesis and chemoresistance, apoptosis, angiogenesis and aging Material and Methods:In this study, we proposed an improved polymerase chain reaction (PCR) method to be used for successful amplification of the Astrocyte elevated gene -1gene promoter region that contains >70% G+C content in a sequence of 495 bp and some transcription initiation sites in hepatocellularcarcinoma patient. Results: The results showed that using of DMSO co-amplification touchdown PCR and pfu enzyme can inhibit the formation of secondary structure in DNA Sequences and increase the PCR product. Conclusion: Therefore, this method can be recommended to amplify other GC-rich genomic templates.</p> واژه های کلیدی: توالی غنی ازG+C- نواحی پروموتری- PCR- ژنAstrocyte elevated gene -1 Key words: GC-rich sequences, PCR, promoter region, Astrocyte elevated gene -1. 831 836 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-120&slc_lang=fa&sid=1 NM samaei نادر منصور سمائی 10031947532846008093 10031947532846008093 No دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران. M Naderi ملیحه نادری 10031947532846008094 10031947532846008094 No دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، 364- 37185، ایران. H khajeh حمیده خواجه 10031947532846008095 10031947532846008095 No مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه زابل، زابل، ایران. N moradipour نگار مرادی پور 10031947532846008096 10031947532846008096 No دانشگاه زابل، ایران، زابل، ایران. N gholipour نغمه قلی پور 10031947532846008097 10031947532846008097 Yes ، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فن‌آوری، مرکز ژنتیک مولکولی، تهران، ایران. P *,Zarghami Moghaddam پرستو ضرغامی مقدم 10031947532846008098 10031947532846008098 No دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران.