fa بررسی تاثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و فاکتورهای رشد بر روی تکثیر سلولهای بنیادی خونساز بندناف در محیط آزمایشگاه علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:nasimYW;"><strong><span style="letter-spacing:.2pt;">مقدمه:</span></strong><span style="letter-spacing:.2pt;"> خون بندناف یکی از مهمترین منابع سلولهای بنیادی خونساز(</span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">HSCs</span><span style="letter-spacing:.2pt;">) است، اما متآسفانه تعداد محدود آنها در واحدهای خون بندناف استفاده از این منبع را در پیوند سلولهای بنیادی برای بزرگسالان محدود نموده است. یکی از روشهای بکار گرفته شده برای غلبه بر این مشکل ، تکثیر سلولهای بنیادی خونساز در محیط کشت است که میتوان علاوه بر فاکتورهای رشد افزودنی از عواملی مانند سلولهایی بنیادی مزانشیمی (</span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">MSCs</span><span style="letter-spacing:.2pt;">) به عنوان لایه </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">Feeder</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> برای تکثیر </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">ex vivo</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> سلولهای بنیادی خونساز استفاده نمود.</span><br> <strong><span style="letter-spacing:.2pt;">روش کار: </span></strong><span style="letter-spacing:.2pt;">سلولهای </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">CD34</span><span style="letter-spacing:.2pt;">+ در دو شرایط مختلف کشت داده شدند شامل : 1) کشت سلولهای </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">CD34</span><span style="letter-spacing:.2pt;">+ در محیط فاقد سرم (</span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">Stemspan</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> ) و در حضور فاکتورهای رشد 2) کشت سلولهای </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">CD34</span><span style="letter-spacing:.2pt;">+ بر روی لایه فیدر سلولهای مزانشیمی در محیط حاوی فاکتورهای رشد. محیط های کشت پس از 8 روز از لحاظ مارکر سطحی </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">CD34</span><span style="letter-spacing:.2pt;">، تعداد کل سلولهای هسته دار (</span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">TNCs</span><span style="letter-spacing:.2pt;">) و آزمون کلونی زایی مورد ارزیابی قرار گرفتند.</span><br> <strong><span style="letter-spacing:.2pt;">یافته‌ها:</span></strong><span style="letter-spacing:.2pt;"> میانگین تعداد سلولهای </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">CD34</span><span style="letter-spacing:.2pt;">⁺</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> و </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">TNCs</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> در محیط اول به ترتیب 9/1</span><span style="letter-spacing:.2pt;">&plusmn;</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> 8/10 ، 3</span><span style="letter-spacing:.2pt;">&plusmn;</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> 2/32 برابر و در محیط دوم به ترتیب3/7</span><span style="letter-spacing:.2pt;">&plusmn;</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> 9/40 ، 1/8</span><span style="letter-spacing:.2pt;">&plusmn;</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> 5/63 برابر بود. اختلاف تعداد سلولها در دو محیط در روز پایانی کشت نسبت به تعداد سلولها در روز صفر (قبل از تکثیر) معنی دار بود (05/0&zwj;</span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">P</span><span style="letter-spacing:.2pt;"><).</span><br> <strong><span style="letter-spacing:.2pt;">نتیجه گیری:</span></strong><span style="letter-spacing:.2pt;"> بکار گیری فاکتورهای رشد و و سلول های بنیادی مزانشیمی بصورت همزمان در محیط های کشت میتواند به ازدیاد </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:.2pt;">HSCs</span><span style="letter-spacing:.2pt;"> در محیط آزمایشگاه کمک شایانی نماید.</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:Arial;"><strong>Introduction:</strong> Umbilical cord blood (UCB) is one of the most important sources of hematopoietic stem cells (HSCs). However, the limited amount of HSCs in UCB has been an obstacle for transplantation of adult hematopoietic stem cell. One of the applied methods to overcome this problem is the proliferation of HSCs in culture medium, so beside the additive growth factors, some other factors such as Mesenchymal stem cells (MSCs) as feeder layer can be used for the proliferation of Hematopoietic stem cells in ex vivo.<br> <strong>Methods:</strong> CD34+ cells were cultured in two different media including; 1) culturing CD34+ cells in serum- free medium (Stemspan) and in the presence of growth factors, 2) culturing CD34+ cells on feeder layer of Mesenchymal stem cells (MSCs) in media including the growth factors. These culture media were evaluated in terms of the number of total nucleated cells (TNCs), CD34 surface marker and CFU assay eight days after the culture.<br> <strong>Results:</strong> The mean of CD34+ cells and TNCs in the first medium was 10.8 &plusmn; 1.9 and 32.2 &plusmn; 3.0 and in the second medium was 40.9 &plusmn; 7.3 and 63.5 &plusmn; 8.1, respectively. The difference between the number of cells in two culture media in the last day of culture and before the proliferation (0 day) was statistically significant (P<0.05).<br> <strong>Conclusions:</strong> The simultaneous application of growth factors and MSCs in culture media could largely contribute to the proliferation of HSCs in ex vivo.</span></span></div> سلول بنیادی خونساز,سلول بنیادی مزانشیمی,خون بند ناف Hematopoietic stem cell, Mesenchymal stem, Cord blood 57 64 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-646&slc_lang=fa&sid=1 Naser Amirizadeh ناصر امیری زاده 100319475328460022255 100319475328460022255 No Blood Transfusion Research Center, High Institute for Education and Research in Transfusion Medicine, Tehran, Iran استادیار، مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران، تهران، ایران Farhad Zaker فرهاد ذاکر 100319475328460022256 100319475328460022256 No Cellular and Molecular Research Center, Department of Hematology, School of Allied Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد، مرکز تحقیقات سلولی مولکولی، گروه هماتولوژی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Saman Sohrabi Akhkand سامان سهرابی آخکند sohrabi.s@umsu.ac.ir 100319475328460022257 100319475328460022257 Yes Faculty of Allied Medicine, Urmia University of Medical Sciences, Urmia, Iran مربی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه، ارومیه، ایران