North Khorasan University of Medical Sciences

other ارزیابی اثر بیان ژن sT پولیوماویروس مرکل سل در میزان بیان ماتریکس متالوپروتئیناز 1 در کارسینومای سلول‌های سنگفرشی در سرطان دهانه رحم آلوده با پاپیلوماویروس پرخطر انسانی تیپ 16: پیامدهای متاستاز Evaluation of the Effect of Merkel Cell Polyomavirus sT Gene Expression on the Expression Level of Matrix Metalloproteinase-1 in Squamous Cell Carcinoma of The Cervix Infected with High-Risk Human Papillomavirus Type 16: Implications for Metastasis علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <div style="text-align: justify;">مقدمه: <a name="_Hlk214717416">عفونت هم‌زمان ویروس‌های پاپیلومای انسانی پرخطر (</a>HR-HPV) با پولیوماویروس‌های انسانی مانند مرکل سل ویروس (MCPyV)، می‌تواند نشان‌دهنده اثر سینرژیک احتمالی باشد. این تحقیق بر نقش پروتئین sT پولیوماویروس مرکل سل (MCPyV sT) متمرکز است که در ایجاد اختلال در مکانیسم‌های تنظیمی سلولی، با آنکوپروتئین‌های HPV شباهت‌هایی دارد. این مطالعه با هدف بررسی اثر آنکوژن MCPyV sT در میزان بیان ژن ماتریکس متالوپروتئیناز-1 MMP-1)) در سلول‌های Ca Ski آلوده با ویروس HPV-16 انجام شد. روش کار: ژن MCPyV sT ابتدا در وکتور PUC57 و پس از تکثیر با PCR، در وکتور بیانی PCMV6 کلون شد. برای تأیید از روش کلونی PCR و هضم آنزیمی و روش توالی‌یابی سنگر استفاده شد. وکتور PCMV6-sT در داخل سلول‌های Ca Ski ترانسفکت شد. کارایی ترانسفکشن از طریق میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری بررسی شد. بیان mRNA sT و تأثیر آن در بیان MMP-1، با روش RT-qPCR بررسی شد. یافته‌ها: بیان بالای ژن sT در سلول‌های ترانسفکت‌شده با پلاسمید PCMV6-sT مشاهده شد. ترانسفکشن PCMV6-sT در سلول‌های آلوده به HPV-16، در مقایسه با گروه‌های کنترل و mock، به افزایش معنی‌دار بیان ژن MMP-1 در 48 ساعت (05/0P<) و 72 ساعت (01/0P<) پس از ترانسفکشن منجر شد. نتیجه‌گیری: MCPyV sT سبب افزایش بیان MMP-1 به‌عنوان نشانگر شاخص فرایندهای تهاجم و متاستاز می‌شود که این موضوع بر اهمیت تعامل بین آنکوپروتئین‌های ویروس‌های مختلف در سلول‌های سرطانی تأکید می‌کند.  </div> <div style="text-align: justify;">Introduction: Co-infection of high-risk human papillomaviruses (HR-HPVs) with human polyomaviruses, such as Merkel cell polyomavirus (MCPyV), may indicate a potential synergistic effect. This study focused on the role of the MCPyV sT protein, which shares similarities with HPV oncoproteins in disrupting cellular regulatory mechanisms. This research aimed to investigate the effect of the MCPyV sT oncogene on the expression level of the matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) gene, as a biomarker for metastasis, in Ca Ski cells infected with HPV-16. Methods: The MCPyV sT gene was cloned into the PUC57 vector. The gene was amplified by PCR and subcloned into the PCMV6 expression vector. Colony PCR, restriction enzyme digestion, and Sanger sequencing were performed to confirm the constructed vector. The PCMV6-sT vector was then transfected into Ca Ski cells. Transfection efficiency was evaluated using fluorescence microscopy and flow cytometry. The expression level of sT mRNA was analyzed by RT-qPCR after transfection. The effect of MCPyV sT expression on MMP-1 expression was assessed using RT-PCR. Results: High expression of the sT gene was observed in cells transfected with the PCMV6-sT plasmid. Transfection of PCMV6-sT into HPV-16–infected cells resulted in a significant increase in MMP-1 gene expression at 48 (P<0.05) and 72 hours (P<0.01) post-transfection, compared to the control and mock groups. Conclusion: The findings indicate that <a name="_Hlk214718077">MCPyV sT </a>increases MMP-1 expression, a marker strongly associated with invasion and metastasis. This highlights the importance of understanding the interactions between oncoproteins of different viruses in cancer cells.  </div> مرکل سل پولیوماویروس, آنتی‌ژن sT, پاپیلوماویروس انسانی تایپ 16, آپوپتوز, MMP-1, سلول‌های Ca Ski, Apoptosis, Ca Ski, HPV16, MCPyV, MMP-1, sT Ag 34 42 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-964&slc_lang=other&sid=1 Tahereh Pakdel طاهره پاکدل 100319475328460031561 100319475328460031561 No Department of Microbiology, College of Science, Agriculture and Modern Technology, Shiraz Branch, Islamic Azad University, Shiraz, Iran دانشجوی دکتری، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز، ایران Mohammad Kargar محمد کارگر 100319475328460031562 100319475328460031562 No Department of Biology, Zand Institute of Higher Education, Shiraz, Iran استاد، گروه زیست‌شناسی، مؤسسه آموزش عالی زند شیراز، شیراز، ایران Ali Farhadi علی فرهادی farhadi_a@sums.ac.ir 100319475328460031563 100319475328460031563 No Department of Medical Laboratory Sciences, School of Paramedical Sciences, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran دانشیار، گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، ایران Mahdokht Hossein Aghdaei مهدخت حسین عقدایی 100319475328460031564 100319475328460031564 Yes Transplant Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran استادیار، بخش تحقیقات پیوند و ترمیم اعضا، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران Leila Kohan لیلا کهن 100319475328460031565 100319475328460031565 No Department of Biology, Arsanjan Branch, Islamic Azad University, Arsanjan, Iran دانشیار، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ارسنجان، ارسنجان، ایران