fa مقایسه روش های P‏CR-RFLP ، مستقیم میکروسکوپی و کشتNNN در تشخیص لیشمانیوز جلدی علوم پایه Basic Sciences مقاله پژوهشی Orginal Research <p>چکیده زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L5.8Sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد. مواد و روش‌کار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL،60 بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN وPCR&ndash;RFLP تهیه گردید. لام‌های رنگ‌آمیزی شده با لنز روغنی&times;100 جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN ، انتقال داده شد. پس از استخراجDNA با استفاده از روش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS1 با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم HaeIII ایزوله‌ها درمقایسه با سویه‌های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS15 مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافته‌ها: روش میکروسکوپی در 36 مورد از 60 بیمار (%60) و نتایج کشت نمونه ها در محیط NNN در 37 مورد (%62) مثبت شد. در روش PCR-RFLP 55 مورد (%91)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.</p> <p>Abstract Background & Objectives: Leishmaniasis is a parasitic infectious disease with a wide clinical spectrum in tropical and subtropical areas. The aim of this study was to assess the PCR-RFLP method using two primers, ITSRL and L5.8S compared with direct microscopy and NNN culture methods for the diagnosis of cutaneous leishmaniasisis. Material & Methods: In this study among CL suspected patients, 60 patients with positive LST were selected and three samples were taken from each. To detect CL via direct microscopy, NNN culture and PCR-RFLP methods. Result:The results showed that 60%, 62% and 91% of specimens from suspected cases were positive using direct microscopy, NNN culture,and.PCR RFLP methods respectively. Conclusion:Due to high sensitivity of the PCR-RFLP method for detection and speciation of etiologic agent of CL, to establish an accurate and rapid method for detection of Leishmania parasites in medical centers, it is suggested the method is utilized along with NNN culture and direct microscopy.</p> واژه های کلیدی:PCR-RFLP , مستقیم میکروسکوپی, کشت, لیشمانیوز جلدی Keyword: PCR-RFLP, direct microscopy, Cutaneous Leishmaniasis, culture 485 491 http://journal.nkums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-70&slc_lang=fa&sid=1 N Hashemi نوشین ‌هاشمی 10031947532846007908 10031947532846007908 No دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران SH Hejazi سیدحسین حجازی 10031947532846007909 10031947532846007909 Yes مرکز تحقیقات بیماری های پوستی و لیشمانیوز، گروه انگل و قارچ‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران M Hashemi میترا ‌هاشمی 10031947532846007910 10031947532846007910 No معاونت پژوهشی، دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران S Hashemi سیروس هاشمی 10031947532846007911 10031947532846007911 No دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران MA Nilforoushzadeh محمد علی نیلفروش زاده 10031947532846007912 10031947532846007912 No مرکز تحقیقات بیماری های پوست و سلول های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران